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【設(shè)備更新系列】等溫滴定量熱儀(ITC)篇

【設(shè)備更新系列】等溫滴定量熱儀(ITC)篇
馬爾文帕納科  2024-08-15  |  閱讀:1654

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大規(guī)模設(shè)備更新的方案正在穩(wěn)步推行中,您的實驗室是否考慮新增或更新一臺分子互作分析儀器?


被數(shù)萬篇科學(xué)論文的引用的等溫滴定微量熱儀,被業(yè)內(nèi)公認(rèn)為分子間相互作用分析的金標(biāo)準(zhǔn)技術(shù),可以用來交叉驗證多種基于表面的生物長安其互作技術(shù)和熒光互作技術(shù)。這里為您簡單介紹一下ITC的主要應(yīng)用,供您參考。



典型應(yīng)用




藥物設(shè)計-先導(dǎo)化合物優(yōu)化

結(jié)合虛擬分子模擬和晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù),ITC技術(shù)可以幫助開發(fā)者設(shè)計和優(yōu)化出既具有較高特異性(焓變貢獻(xiàn)為主)、且具有較好的透膜性 (熵變貢獻(xiàn)為主) 的藥物分子 (熵焓平衡設(shè)計) 。


圖1:HIV-蛋白酶抑制劑的研發(fā)過程


圖2:第二代他汀類藥物(Statins)




篩選和交互驗證結(jié)合特異性

表觀遺傳學(xué)中的組蛋白marker研究,通過ITC實驗,用具有不同甲基化修飾以及序列的組蛋白肽段marker (下圖中由左向右依次為: H3K4me3, H3C4me3和H3G4)滴定蛋白TAF3 PHD結(jié)構(gòu)域,從而確認(rèn)特異性結(jié)合的組蛋白marker。


圖3:由左向右依次為: H3K4me3, H3C4me3和H3G4




酶學(xué)動力學(xué)研究

Microcal ITC可以在無需對底物或產(chǎn)品進(jìn)行任何修飾的情況下完成酶促動力學(xué)的研究,獲取Km, kcat和Ki等數(shù)據(jù)。采用ITC和分光光度計進(jìn)行酶促動力學(xué)(PNPP-PP1-γ)的研究的對比。使用兩種不同技術(shù)獲得的酶促動力學(xué)速率參數(shù)吻合非常好。




圖4:不同技術(shù)獲得的酶促動力學(xué)速率參數(shù)吻合





全自動的Microcal PEAQ-ITC Automated將Microcal PEAQ-ITC的卓越性能與全自動化運行相結(jié)合,實現(xiàn)自動化與智能化運作。相比手動版,自動版將分析效率提升7倍。全自動化實現(xiàn)加樣,清洗,樣品轉(zhuǎn)移,減少人員操作誤差,減少新手培訓(xùn)和指導(dǎo)時間,提升數(shù)據(jù)質(zhì)量和儀器使用效率。



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